华南农大郭霄峰团队首次揭示TRIM7在狂犬病病毒感染中的抗病毒功能学术天地

华南农大郭霄峰团队首次揭示TRIM7在狂犬病病毒感染中的抗病毒功能

狂犬病病毒（RABV）可以感染几乎所有温血动物，一旦发病，死亡率为100%。目前尚无特定的治疗药物，是危害我国乃至全球公共卫生安全的重要传染病之一。含三联基序的蛋白7（TRIM7）是三联基序（TRIM）家族的一员，在针对病毒感染的先天免疫反应中起重要作用。然而，TRIM7在RABV感染中的功能尚未见报道。

近日，华南农业大学兽医学院微生物学与免疫学教研室郭霄峰教授团队在《Emerging Microbes & Infections 》发表了题为TRIM7 Inhibits Rabies Virus Replication by Promoting K48-Linked Ubiquitination and Degradation of RABV-M的最新研究成果。研究通过RNA-seq测序，鉴定了RABV感染小鼠神经母细胞瘤细胞（NA）后一些差异表达的TRIM蛋白。敲低TRIM7会促进RABV复制。相反，过表达TRIM7显著抑制RABV复制，并延长乳鼠RABV致死时间，然而，这一效应可以被蛋白酶体抑制剂逆转。进一步研究发现TRIM7与RABV基质蛋白（M）之间存在直接相互作用。TRIM7通过促进RABV-M的K48连接泛素化降解来抑制病毒复制。此外，RABV-M中的115位赖氨酸（K115）被确定为TRIM7介导M泛素化及降解的共同位点。综上所述，此研究表明，TRIM7通过促进RABV-M的泛素化及降解来抑制RABV复制，为狂犬病的治疗提供了新的治疗靶点。

研究亮点

1、首次揭示TRIM7在狂犬病病毒感染中的抗病毒功能。

2、阐明TRIM7靶向病毒M蛋白并通过泛素-蛋白酶体途径降解的新机制

3、锁定RABV-M蛋白上的K115是TRIM7介导泛素化及降解的共同靶位点，为抗病毒作用提供了新靶点，为开发抗狂犬病药物提供了重要思路。

1.TRIM7 在狂犬病毒感染期间表达上调

为了全面研究宿主对RABV的潜在免疫反应，团队将RABV感染组和对照组小鼠神经细胞瘤母细胞的样本进行了转录组测序和聚类分析，鉴定出大量差异表达的基因，其中E3泛素连接酶 TRIM7 的转录显著上调。基于此，团队对感染RABV 的NA细胞和感染RABV的小鼠大脑组织进行实验分析。结果表明，RABV 感染可以在体外和体内上调 TRIM7 的表达。

2.TRIM7 抑制 RABV 复制

团队通过沉默TRIM7和过表达TRIM7，评估了TRIM7在狂犬病毒（RABV）复制中的调控作用。结果表明沉默TRIM7促进了RABV的复制，过表达TRIM7限制了 RABV 的复制。总体而言，上述结果证明TRIM7在细胞中对 RABV 具有抗病毒活性。

3.重组 rRABV-TRIM7 延迟感染乳鼠的死亡

为测试TRIM7 在体内是否也具有抗病毒功能，团队通过反向遗传操作技术，获得拯救毒株rRABV（HEP-Flury）、rRABV-TRIM7和 rRABV-TRIM7（-），并用其感染NA细胞进行验证实验，结果进一步表明 TRIM7在体外抑制RABV复制。将出生三天左右的KM乳鼠颅内感染rRABV、rRABV-TRIM7和 rRABV-TRIM7（-），监测其生存情况。数据表明 TRIM7 在小鼠体内发挥抗病毒作用，可延迟乳鼠发病死亡。

4.TRIM7 泛素化降解 K48 残基上的 RABV-M 蛋白

为探索TRIM7泛素化降解RABV-M的位点，将泛素化质粒Ub-HIS、RABV-M与TRIM7质粒共转染293T细胞，进行Co-IP实验，通过Western Blot检测目的蛋白泛素化情况。结果显示TRIM7主要诱发的是K48链泛素化降解RABV-M。

5.TRIM7的BBOX结构域直接与 RABV-M 相互作用

为探明TRIM7与RABV结构蛋白互作情况，本研究利用标签抗体进行免疫共沉淀，Western blot 对Co-IP的产物进行检测，结果表明，TRIM7与RABV-M存在蛋白互作，而结构域BBOX是TRIM7蛋白与RABV-M结合的关键区域。

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