作者
谢梓民，陈滢仪, 杜珊瑶, 黄秀梅, 邵玉欢, 黄江武，廖明, 代曼曼
单位
a华南农业大学兽医学院，人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室，广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室，广州
b中英禽病国际研究中心（广州）
摘要
H9N2 亚型禽流感病毒（AIV）持续构成威胁，因为灭活疫苗（InV）通常无法阻止病毒脱落。为了解决这个问题，该团队研发了一种重组火鸡疱疹病毒（HVT-BNT），该病毒表达H9N2 AIV保守的B和T细胞表位，以增强体液和细胞免疫。研究表明，HVT-BNT在15次连续传代中表现出遗传稳定性，其生长动力学与亲本菌株在体外的复制能力相当。研究团队在1日龄雏鸡和18日龄鸡胚中分别通过皮下（HVT-BNT+InV）和胚内（HVT-BNT-ovo+InV）途径评估了HVT-BNT与InV联合的免疫策略。与单独的InV相比，HVT-BNT+InV显著提高了HI和中和抗体滴度、IgG和IgM水平以及CD8+T细胞的比例。同样，HVT-BNT-ovo+InV组在这些指标上也表现出相同的趋势。值得注意的是，与对照组相比，InV组在关键免疫细胞因子方面没有显著差异，而联合免疫组表现出IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IL-2、IL-5、IL-6、IL-10和IL-13的显著上调。此外，ELISPOT检测证实，在联合免疫组中，保守的AIV肽（NP380-393、NP455-463和NS198-106）能显著增强IFN-γ的分泌。在异源高剂量（10⁷ EID₅₀）H9N2禽流感病毒（AIV）攻毒后，联合免疫组的咽拭子阳性率在攻毒后5天（5 DPI）时低于InV组。同样，在3 DPI和5 DPI时，与InV组相比，联合免疫组的泄殖腔阳性率更低。到7 DPI时，两个联合免疫组的病毒脱落被完全清除，而InV组仍有通过口咽途径排出病毒的鸡只。这些发现表明，基于HVT-BNT的疫苗接种策略有效地增强了宿主的体液和细胞免疫反应，提供了更好地早期保护。虽然胚内策略提供了一种可行的干预，但1日龄皮下途径表现出更优的免疫激活和保护作用。
